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Authors: Santos, Thaís Costa
metadata.dc.contributor.advisor: Silva, Juliana Fonseca Moreira da
Title: Identificação e avaliação do potencial probiótico de leveduras isoladas de frutos amazônicos para aplicação em alimentos
Keywords: Leveduras. Potencial probiótico. Frutos amazônicos. Yeasts. Probiotic potential. Amazonian fruits
Issue Date: 2-Aug-2023
Publisher: Universidade Federal do Tocantins
metadata.dc.publisher.program: Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia de Alimentos - PPGCTA
Citation: SANTOS, Thaís Costa. Identificação e avaliação do potencial probiótico de leveduras isoladas de frutos amazônicos para aplicação em alimentos.2023. 66f. Dissertação (Mestrado em Ciência e Tecnologia de Alimentos) – Universidade Federal do Tocantins, Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia de Alimentos, Palmas, 2023.
metadata.dc.description.resumo: Probióticos são considerados microrganismos que quando ingeridos em quantidades suficientes e adequadamente podem resultar em diversos benefícios à saúde do hospedeiro. Dentre os microrganismos que possuem esse potencial, as leveduras têm ganhado destaque quanto sua aplicação probiótica, e entre os gêneros, a levedura Saccharomyces boulardii é a mais conhecida e disponível comercialmente como probiótica. Bacupari (Garcinia gardneriana), tucumã (Astrocaryum aculeatum) e pupunha (Bactris gasipaes Kunth), são frutos nativos da região amazônica, ricos em fibras, lipídios e carotenóides; apreciados principalmente pela população do Norte do país e apresentam grande potencial biotecnológico. Assim, a presente pesquisa identificou e avaliou o potencial probiótico de leveduras isoladas de frutos nativos da região amazônica para posterior aplicação na indústria alimentícia. Foram reativadas 418 leveduras previamente isoladas dos frutos supracitados, dessas, 321 estavam viáveis, seguiram para a análise morfológica e testes de crescimento a 37 °C, capacidade de sobreviver a ambiente ácido (pH 1-2, pepsina 3 g/L e NaCl 5 g/ L), resistência aos antifúngicos fluconazol e anfotericina B, e atividade antagonista contra os seguintes patógenos: Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Typhimurium (ATCC 14028), Escherichia coli (CDC EDL 1284-ATCC 43893), Shigella sonnei (ATCC 11060) e Staphylococcus aureus (ATCC 25923). Foram realizados testes de tolerância a sais biliares (0,3%), capacidade de auto agregação e coagregação, fatores de virulência (lipase, gelatinase, DNAse e atividade hemolítica) e preservação sob a forma de liofilização. Os resultados obtidos, mostram que das 321 leveduras submetidas ao teste de crescimento à temperatura corporal de mamíferos (37 °C) 288 apresentaram crescimento, dessas 213 conseguiram crescer em condições simuladas da acidez estomacal. Das 57 leveduras foram sensíveis a anfotericina B, 12 apresentaram atividade antagonista contra os patógenos testados. Além disso, todas as 12 leveduras testadas na presença de 0,3% de oxgall apresentaram viabilidade, porém, nos testes de auto agregação e coagregação apenas três leveduras foram selecionadas, essas foram submetidas aos testes de fatores de virulência e demonstraram estar aptas para seguir para liofilização utilizando três crioprotetores. Os resultados obtidos durante o processo de liofilização indicam que a levedura LTC 13 apresentou os melhores resultados, sendo que, dentre os crioprotetores utilizados, a glicose 10% apresentou o melhor desempenho durante o processo. Quanto à identificação molecular, as três leveduras pertencem às seguintes espécies: Meyerozyma carpophila, Meyerozyma guilliermondii e Rhodotorula mucilaginosa.
Abstract: Probiotics are considered microorganisms that, when ingested in sufficient and adequate amounts, can result in several benefits to the health of the host. Among the microorganisms that have this potential, yeasts have gained prominence in terms of their probiotic application, and among the genera, the yeast Saccharomyces boulardii is the best known and commercially available as a probiotic. Bacupari (Garcinia gardneriana), tucumã (Astrocaryum aculeatum) and pupunha (Bactris gasipaes Kunth), are fruits native to the Amazon region, rich in fiber, lipids and carotenoids; appreciated mainly by the population of the North of the country and have great biotechnological potential. Thus, the present research identified and evaluated the probiotic potential of yeasts isolated from native fruits of the Amazon region for later application in the food industry. 418 yeasts previously isolated from the aforementioned fruits were reactivated, of which 321 were viable, followed for morphological analysis and growth tests at 37°C, ability to survive an acidic environment (pH 1-2, pepsin 3 g/L and NaCl 5 g/L), resistance to fluconazole and amphotericin B antifungals, and antagonistic activity against the following pathogens: Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium (ATCC 14028), Escherichia coli (CDC EDL 1284-ATCC 43893), Shigella sonnei (ATCC 11060) and Staphylococcus aureus (ATCC 25923). Bile salt tolerance tests (0.3%), self-aggregation and coaggregation capacity, virulence factors (lipase, gelatinase, DNAse and hemolytic activity) and preservation in the form of lyophilization were performed. The results obtained show that of the 321 yeasts submitted to the growth test at mammalian body temperature (37°C) 288 showed growth, of which 213 were able to grow in simulated conditions of stomach acidity. Of the 57 yeasts that were sensitive to amphotericin B, 12 showed antagonistic activity against the tested pathogens. In addition, all 12 yeasts tested in the presence of 0.3% oxgall showed viability, however, in the self-aggregation and coaggregation tests, only three yeasts were selected, which were submitted to virulence factor tests and demonstrated to be able to follow for lyophilization using three cryoprotectants. The results obtained during the lyophilization process indicate that the yeast LTC 13 presented the best results, and, among the cryoprotectants used, glucose 10% presented the best performance during the process. As for molecular identification, the three yeasts belong to the following species: Meyerozyma carpophila, Meyerozyma guilliermondii and Rhodotorula mucilaginosa.
URI: http://hdl.handle.net/11612/6139
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