Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11612/3730
Authors: Monteiro, Joseane Rodrigues
metadata.dc.contributor.advisor: Almeida, Katyane de Sousa
Title: Aplicação de imunossensor piezoelétrico para identifição de anticorpos contra Leishmania infantum em soro felino
Keywords: Biossensor. Gato. Imunodiagnóstico. Leishmaniose Visceral Felina.
Issue Date: 14-Dec-2021
Citation: MONTEIRO, Joseane Rodrigues . Aplicação de imunossensor piezoelétrico para identifição de anticorpos contra Leishmania infantum em soro felino.2021.62f. Dissertação (Mestrado em Sanidade Animal e Saúde Pública nos Trópicos) – Universidade Federal do Tocantins, Programa de Pós-Graduação em Sanidade Animal e Saúde Pública nos Trópicos, Araguaína, 2021.
metadata.dc.description.resumo: O diagnóstico da leishmaniose felina continua sendo um desafio para a saúde pública, incluindo a falta de protocolos específico para gatos. A aplicação de biossensores como ferramenta analítica tem sido uma alternativa favorável. Assim este estudo propôs o desenvolvimento de um imunossensor piezoelétrico para detecção qualitativa de anticorpos anti-antígeno A2 de Leishmania infantum em soro felino. Foi usado como antígeno a proteína recombinante A2 de L. infantum e como amostra, soro felino sabidamente positivo. A microbalança de cristal de quartzo com monitoramento de dissipação foi utilizada para a realização dos testes a partir de dois protocolos de imobilização: adsorção simples e monocamada auto-organizada (SAM) do tipo tiol implementada por dissulfeto de carbono (CS2). As medidas nanogravimétricas foram realizadas por meio de um software específico gerando um gráfico em tempo real A resposta analítica de cada imunossensor foi avaliada por meio da variação da frequência em função do tempo antes e após a adição da amostra. A capacidade de biorreconhecimento do imunossensor foi testada incubando amostra de soro felino positiva para leishmaniose visceral, sendo considerada positiva no imunossensor por meio da diminuição da frequência de ressonância do sensor. Os resultados obtidos pela análise da reatividade dos imunossensores elaborados tanto por adsorção simples quanto por SAM mediada por CS2, demonstraram padrão de resposta indicativo de detecção de anticorpos anti-antígeno A2 presente em soro felino a partir da imobilização de antígeno recombinante A2 de L. infantum, gerando perspectivas quanto ao potencial para aplicação na triagem de amostras sorológicas de gatos em áreas endêmicas, podendo ajudar a compreender a participação desses na epidemiologia da leishmaniose visceral e, consequentemente, contribuir para seu monitoramento e controle, sendo uma ferramenta promissora para auxiliar estudos epidemiológicos e diagnósticos clínicos da doença em felinos.
Abstract: The diagnosis of feline leishmaniasis remains a public health challenge due to the lack of specific protocols for cats. The application of biosensors as an analytical tool has been a favorable alternative. Thus, this study proposed the development of a piezoelectric immunosensor for the qualitative detection of anti-Leishmania infantum A2 antigen antibodies in feline serum. Recombinant protein A2 from L. infantum was used as antigen and feline serum known to be positive was used as a sample. A quartz crystal microbalance with dissipation monitoring was used to carry out the tests based on two immobilization protocols: simple adsorption and self-assembled monolayer (SAM) of the thiol type implemented by carbon disulfide (CS2). Nanogravimetric measurements were performed using specific software, generating a real-time graph. The analytical response of each immunosensor was evaluated by varying the frequency as a function of time before and after the addition of the sample. The biorecognition capacity of the immunosensor was tested by incubating a feline serum sample positive for visceral leishmaniasis, being considered positive in the immunosensor by decreasing the sensor's resonance frequency. The results obtained by the analysis of the reactivity of immunosensors prepared by both simple adsorption and CS2-mediated SAM demonstrated a pattern of response indicative of detection of anti-A2 antigen antibodies present in feline serum from the immobilization of L. infantum recombinant A2 antigen , generating perspectives on the potential for application in the screening of serological samples of cats in endemic areas, which may help to understand their participation in the epidemiology of visceral leishmaniasis and, consequently, contribute to its monitoring and control, being a promising tool to support epidemiological and diagnostic studies of the disease in felines.
URI: http://hdl.handle.net/11612/3730
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